IMPORTANCE DE LA TROISIEME REGION VARIABLE DE LA CHAINE HLA-DRß DANS LA SELECTION DE LA REGION CDR3ß DU TCR ET DANS LA SPECIFICITE DE FIXATION DES PEPTIDES ANTIGENIQUES.

Bader M. YASSINE -DIAB

Ce travail concerne l’étude des interactions trimoléculaires entre les molécules HLA-DR, le peptide et les TCR des lymphocytes T CD4^+.

Pour comprendre l’importance de la molécule HLA-DR dans la fixation des peptides antigéniques et dans l’interaction avec le recepteur des cellules T, nous avons étudié le rôle des résidus polymorphes de la 3^ème région variable de la chaîne DRβb dans le cas d’une présentation spécifique d’antigène ainsi que dans une pathologie auto immune, la polyarthrite rhumatoïde .

Dans un premier temps, nous avons étudié la fixation de 23 peptides synthétiques issus du fragment CB11 du collagène II humain sur 22 cellules EBV homozygotes experimant les molécules HLA-DR associées ou non à la susceptibilité à la polyarthrite rhumatoïde. Ce travail nous a permis de:

       1.       Caractériser un peptide du collagène II humain qui se fixe de façon préférentielle sur les molécules HLA-DR  impliquées dans la susceptibilité à cette maladie.

       2.       Montrer que la spécifité de fixation de ce peptide est médiée par le résidu 74 de la 3^ème région variable chaîne b de la molécule DR.

Ensuite, nous avons étudié le repertoire des clones T restreints par deux molécules HLA-DR de séquences très proches qui ne diffèrent que par trois acides aminés localisés dans la 3^ème région variable de la chaîne aux positions 67, 70 et 71.

Pour définir le rôle respectif de chacun de ces résidus, nous avons travaillé avec des transfectant fibroblastiques murins qui expriment un seul type de molécules HLA-DR (naturelles ou mutantes). Nous avons analysé la reconnaissance d’un peptide dégénéré, le peptide HA (306-318) de l’hemagglutinine de l’influenza, présenté par huit molécules HLA-DR qui différent entre elles par un, deux ou trois acide (s) aminé(s).  Les effets de substitutions à ces trois positions ont été analysés, et l’usage des gènes aαetβb des TCRs d’environ 30 clones T a été determiné. Ces travaux ont montré :

1-      L’importance du résidu 71 de la chaîne DRb dans la reconnaissance du TCR pour l’ensemble des clones restreints soit par DR0101, soit par DR0103.

2-      La nature des acides aminés de diffèrentes régions hypervariables du TCR qui interagissent avec les molécules HLA-DR ou les peptides.

L’ensemble de ces travaux a permis de mieux comprendre la nature des interactions qui résident entre les molécules HLA-DR, le peptide antigénique et le récepteur des cellules T, et de proposer un modèle de reconnaissance impliquant différents résidus de ces trois molécules.